近日,湖南大學蔡仁/南華大學楊紅芬基于CRISPR/Cas12a交叉切割技術和高效納米酶,制造了一種智能手機介導的自供電生物傳感器,用于檢測miRNA-141。AuPtPd@GDY納米酶作為一種新型納米酶和信號放大協同作用加速器,表現出催化級聯顯色反應的優異能力和高電導率,以增強miRNA-141測定的電化學信號。在CRISPR/Cas12a橫切S2葡萄糖氧化酶(S2-GOD)后,電化學信號減弱,通過監測信號的減少來檢測miRNA-141。相關工作以“A Smartphone-Mediated “All-In-One” Biosensing Chip for Visual and Value-Assisted Detection”為題發表在國際著名期刊Analytical Chemistry上。
研究要點
要點1. 作者報告了一種基于CRISPR/Cas12a交叉切割技術和高效納米酶的新型自供電生物傳感器,用于視覺和價值輔助檢測miRNA-141。
要點2. 發夾H2順序地使miRNA-141和ExoIII(即核酸外切酶)雜交,形成ExoIII-H2-miRNA-141,這是一種環狀結構,經ExoIII特異性切割后釋放出miRNA-141,H2仍呈發夾環形式。釋放的miRNA-141進一步參與下一個循環過程。當Cas12a/crRNA復合物(一種DNA切割酶)被添加到陽極室中時,形成Cas12a/crRNA/H2二倍體結構,激活Cas12a的核酸酶切割活性,以非特異性消化S2葡萄糖氧化酶(S2-GOD,即單鏈核苷酸)。S2-GOD完全降解后,生物傳感器的電化學信號減弱,在此過程中檢測到miRNA-141。
要點3. 自供電生物傳感器能夠實現miRNA-141的數值輔助和視覺檢測,檢測限分別為3.1和15 aM。基于雙模自供電傳感系統,設計了一種智能手機介導的“一體式”生物傳感芯片,實現了對miRNA-141的實時智能監測。
這項工作為設計多功能生物傳感器提供了一種新方法,以實現腫瘤生物標志物的可視化和便攜式檢測。
研究圖文
圖1. AuPtPd@GDY的表征。
圖2. 電極修飾過程。
圖3.(a)AuPtPd@GDY納米酶機制示意圖.(b)不同反應體系的紫外-可見光譜。(c)催化反應體系中·OH的EPR譜。催化過程中的(d)自由能圖和(e)狀態密度。
圖4.(a)在電化學模式下,存在不同濃度的miRNA-141的自供電生物傳感器的Eocv。(b)Eocv和miRNA-141濃度之間的關系(插圖:校準圖)。(c)在比色模式下,在不同濃度的miRNA-141存在下,自供電生物傳感器的紫外-可見吸收率。(d)紫外吸光度(652 nm處)和miRNA-141濃度之間的關系(插圖,反應溶液顏色變化的照片圖像)。
文獻詳情
A Smartphone-Mediated “All-In-One” Biosensing Chip for Visual and Value-Assisted Detection
Jing Xu, Yujin Li, Futing Wang, Hongfen Yang,* Ke-Jing Huang, Ren Cai,* Weihong Tan
Anal. Chem.
DOI: https://doi.org/10.1021/acs.analchem.4c03854
來源:崛步化學
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