熒光分光光度計常用的光源是氙燈和鎵砷化鎵（GaAs）。

氙燈是熒光分光光度計中常見的光源之一。它能夠提供連續(xù)的光譜，波長范圍通常在190nm至900nm之間。氙燈具有高亮度、穩(wěn)定性和長壽命等特點，適用于廣泛的熒光分析應(yīng)用。氙燈的光譜強度與波長有明顯的相關(guān)性，能夠較好地滿足熒光測定的要求。

在某些特殊的應(yīng)用中，鎵砷化鎵（GaAs）也被用作熒光分光光度計的光源。與氙燈不同，GaAs使用激光二極管（LD）作為激發(fā)源，具有較窄的發(fā)射譜帶。GaAs在波長為780nm到905nm之間提供高亮度的激光光源，可以充分滿足特定波長的熒光分析需求。

熒光測定中需要注意的一些主要問題如下：

1. 選擇合適的溶劑和溶液組成：熒光測定的樣品需要在溶液中進行，正確選擇溶劑以及樣品與溶劑的比例非常重要，以確保樣品能夠溶解并得到準確的測量結(jié)果。
2. 防止內(nèi)部光散射和測量背景：熒光測定中的背景信號可能來自儀器和試劑的自發(fā)發(fā)光，必須通過相應(yīng)的空白試驗控制這些背景信號，并進行相應(yīng)的背景校正。
3. 消除散射和吸收：散射是熒光測定中非常常見的問題之一，因為它會干擾到底物和產(chǎn)物的熒光信號。可以通過合理調(diào)整測量條件、改變反應(yīng)物濃度和添加吸收劑等方法來消除或減小散射和吸收的影響。
4. 校正熒光光譜的重疊：在多成分分析中，熒光光譜的重疊可能導(dǎo)致測定結(jié)果的誤差。針對這個問題，可以使用多元回歸分析、主成分分析或者最小二乘法進行數(shù)據(jù)處理和解析，以準確獲得每個組分的濃度。
5. 最佳測量條件的確定：熒光測定的靈敏度和選擇性高度依賴于測量條件的優(yōu)化。例如，調(diào)整激發(fā)光的波長和強度、選擇合適的檢測濾光片、調(diào)整樣品濃度等都可能對測量結(jié)果產(chǎn)生重要影響，因此需要仔細考慮和優(yōu)化測量條件。
6. 樣品的制備和保存：熒光測定結(jié)果可能會受到樣品制備過程中的溫度、光照和時間等因素的影響。為減小這些影響，應(yīng)該選擇合適的制備方法，并且在分析過程中保持樣品的穩(wěn)定性。
7. 合適的儀器校準和驗證：為確保熒光分光光度計的準確性和可靠性，需要對儀器進行校準和驗證。這可以通過使用已知熒光強度的參考標準或標準工具進行比較和檢驗來完成。

總結(jié)起來，熒光分光光度計常用的光源是氙燈和鎵砷化鎵（GaAs）。在熒光測定中需要注意選擇合適的溶劑和溶液組成、控制背景信號、消除散射和吸收、校正熒光光譜的重疊、確定最佳測量條件、樣品的制備和保存以及儀器校準和驗證等主要問題。