BtCry1Ab/1Ac轉(zhuǎn)基因試紙也稱轉(zhuǎn)基因檢測(cè)試紙,由托普云農(nóng)公司供應(yīng),是用于快速檢測(cè)種子或植物葉片等樣品中的轉(zhuǎn)基因,靈敏度為1%,整個(gè)檢測(cè)過程只需要10-15分鐘,適用于各類企業(yè)及檢測(cè)機(jī)構(gòu)。下面我們就來具體的聊一聊轉(zhuǎn)基因檢測(cè)試紙的具體信息,以及它是如何使用的。
轉(zhuǎn)基因試紙檢測(cè)原理:轉(zhuǎn)基因BtCry1Ab/1Ac快速檢測(cè)試紙應(yīng)用雙抗體夾心免疫層析的原理,樣本中的抗原在側(cè)向移動(dòng)的過程中與膠體金標(biāo)記的特異性單克三隆抗體1結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物,繼續(xù)向前方流動(dòng)和NC膜檢測(cè)線上特異性單克隆抗體2的結(jié)合形成雙抗體夾心復(fù)合物。如果樣本中轉(zhuǎn)基因蛋白占可溶性蛋白的含量大于1%,檢測(cè)線(T線)顯紅色,結(jié)果為陽性;反之,檢測(cè)線(T線)不顯色,結(jié)果為陰性。
【樣品處理】
植物種子:
1、稱取0.25g粉碎的種子樣本(玉米、水稻等),到干凈提取管中。充分粉碎樣本能夠提高測(cè)試準(zhǔn)確度。)
2、加0.75mL緩沖液溶解。
3、蓋好提取管的蓋子,用力上下振蕩提取管20~30s,確保樣品與緩沖液充分混勻。靜置等待固體物質(zhì)沉淀在管底。吸取500μL上清用于檢測(cè)。
4、請(qǐng)注意不要交叉污染,每個(gè)樣品采用單獨(dú)的提取管。
葉片組織:
1、將植物葉片組織置于一次性組織提取管的蓋子與管身之間,迅速蓋住蓋子,重復(fù)2次,得到2片圓形葉片組織。用杵將葉片置于提取管的底部。用記號(hào)筆在管壁做好標(biāo)記。
2、將葉片充分搗碎。
3、加入0.2mL樣品緩沖液。
4、重復(fù)碾碎步驟使樣品與緩沖液充分接觸混合。拿掉杵棒(注意請(qǐng)將杵棒一次性使用,以免不同樣品間交叉污染)。
【轉(zhuǎn)基因試紙使用步驟】
1、測(cè)試前請(qǐng)完整閱讀使用說明書,并將試紙和待檢樣本溶液恢復(fù)至常溫。
2、從包裝袋中取出試紙后請(qǐng)盡快使用;
3、將試紙插入提取管中,開始計(jì)時(shí);
4、結(jié)果應(yīng)在10-15分鐘內(nèi)讀取,其他時(shí)間判讀無效;
【結(jié)果判斷】
1、陰性(-):C線顯色,T線不顯色(測(cè)試線,靠近加樣孔一端);
2、陽性(+):C線顯色,T線顯色肉眼可見(測(cè)試線,靠近加樣孔一端),
3、無效:未出現(xiàn)C線,可能操作不當(dāng)或試紙已失效。在此情況下,應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書,并用新的試紙重新測(cè)試。
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