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PCR 的問題，無疑是絕大多數(shù)學(xué)生物的人都關(guān)心的問題。今天我們把相關(guān)內(nèi)容整理出來，與大家共同討論，希望對大家能有所幫助。
一、引物設(shè)計(jì)
所謂“工欲善其事，必先利其器”，這年頭手工設(shè)計(jì)引物的人似乎不多，還是用軟件方便些，防止你一不小心看走眼，丟一個(gè)堿基，同時(shí)計(jì)算起來也方便。設(shè)計(jì)軟件有很多，既可以在線設(shè)計(jì)，也可以用Primer5、Oligo6.65 等等。
1. 引物設(shè)計(jì)的原則
細(xì)心地進(jìn)行引物設(shè)計(jì)是PCR 中最重要的一步。理想的引物對只同目的序列兩側(cè)的單一序列而非其他序列退火。設(shè)計(jì)糟糕的引物可能會(huì)同時(shí)擴(kuò)增其他的非目的序列。下面的指導(dǎo)描述了一個(gè)可以增加特異性的引物所具有的令人滿意的特點(diǎn)：
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